Identifikasi bakteri patogen seperti Pseudomonas aeruginosa merupakan langkah krusial dalam diagnosis klinis dan pengendalian infeksi. Pseudomonas aeruginosa adalah bakteri Gram-negatif, aerobik, dan oportunistik yang dikenal sebagai penyebab infeksi serius pada manusia, terutama pada individu dengan sistem kekebalan tubuh yang lemah, pasien yang dirawat di rumah sakit, atau penderita penyakit kronis seperti cystic fibrosis. Kemampuannya untuk beradaptasi di berbagai lingkungan dan resistensinya terhadap antibiotik menjadikannya tantangan tersendiri. Oleh karena itu, pengujian biokimia menjadi alat yang sangat berharga untuk mengkonfirmasi keberadaan dan mengidentifikasi spesies ini dengan akurat.
Meskipun teknik molekuler modern seperti PCR semakin populer, pengujian biokimia tetap relevan dan seringkali menjadi lini pertama dalam identifikasi bakteri di laboratorium mikrobiologi. Keunggulan utama metode ini meliputi biaya yang relatif rendah, kemudahan pelaksanaan, dan kemampuan untuk memberikan informasi tambahan mengenai karakteristik metabolik bakteri. Dalam kasus Pseudomonas aeruginosa, pengujian biokimia memungkinkan kita membedakannya dari spesies Pseudomonas lainnya atau bahkan bakteri Gram-negatif lain yang mungkin menunjukkan morfologi serupa di bawah mikroskop.
Beberapa tes biokimia telah ditetapkan sebagai standar dalam identifikasi Pseudomonas aeruginosa. Tes-tes ini didasarkan pada kemampuan enzim spesifik dalam bakteri untuk memodifikasi substrat tertentu, menghasilkan perubahan warna atau hasil yang dapat diamati. Berikut adalah beberapa tes yang paling sering digunakan:
Ini adalah tes karakteristik paling penting untuk genus Pseudomonas. Pseudomonas aeruginosa secara konsisten menunjukkan hasil positif pada tes oksidase. Tes ini mendeteksi keberadaan enzim sitokrom c oksidase, yang berperan dalam rantai transpor elektron aerobik. Bakteri diteteskan pada kertas yang dibasahi dengan reagen tetramethyl-p-phenylenediamine. Pembentukan warna ungu atau biru tua dalam waktu singkat (10-30 detik) menandakan hasil positif.
Sebagian besar strain Pseudomonas aeruginosa juga positif untuk tes katalase. Tes ini mendeteksi enzim katalase yang memecah hidrogen peroksida menjadi air dan oksigen. Bakteri ditambahkan ke dalam larutan hidrogen peroksida 3%. Munculnya gelembung gas (oksigen) menunjukkan hasil positif. Tes katalase membantu membedakan dari beberapa bakteri lain yang mungkin memiliki hasil oksidase positif.
Salah satu ciri khas Pseudomonas aeruginosa adalah kemampuannya untuk memproduksi pigmen. Dua pigmen utama yang sering diamati adalah:
Amati pertumbuhan koloni pada media agar, terutama media agar King A dan King B, yang dirancang untuk menstimulasi produksi pigmen.
Tes ini mengevaluasi kemampuan bakteri untuk menggunakan sumber karbon tertentu. Pseudomonas aeruginosa biasanya mampu menggunakan berbagai sumber karbon. Salah satu tes yang umum adalah penggunaan sitrat. Bakteri yang dapat menggunakan sitrat sebagai satu-satunya sumber karbon akan menunjukkan pertumbuhan pada media sitrat Simmons yang berubah warna dari hijau menjadi biru.
Pseudomonas aeruginosa adalah bakteri yang motil, artinya mampu bergerak menggunakan flagela. Tes motilitas dapat dilakukan dengan menanam bakteri pada media agar semi-padat. Pergerakan bakteri menjauh dari garis inokulasi menunjukkan motilitas positif.
Kombinasi hasil dari serangkaian uji biokimia ini sangat penting untuk identifikasi yang akurat. Hasil positif pada tes oksidase, katalase, produksi pigmen khas (seperti piosianin dan piovirdin), serta kemampuan menggunakan sitrat, dikombinasikan dengan morfologi koloni yang khas (misalnya, permukaan yang agak berkilau, seringkali dengan bau aromatik seperti anggur atau tortilla), secara kuat menunjukkan keberadaan Pseudomonas aeruginosa.
Penting untuk diingat bahwa beberapa spesies Pseudomonas lain mungkin berbagi beberapa karakteristik biokimia. Oleh karena itu, kombinasi beberapa tes dan mempertimbangkan karakteristik lain seperti profil resistensi antibiotik (jika relevan) akan meningkatkan keandalan identifikasi. Dalam situasi klinis yang memerlukan identifikasi yang lebih definitif atau ketika hasil biokimia meragukan, teknik mikrobiologi molekuler dapat digunakan sebagai metode konfirmasi.
Dengan pemahaman mendalam tentang profil biokimia Pseudomonas aeruginosa, laboratorium dapat secara efektif mengidentifikasi dan mengelola infeksi yang disebabkan oleh patogen yang tangguh ini.